Che cos'è un lettore ELISA?
Un lettore ELISA è uno strumento progettato per misurare l'assorbanza di campioni contenuti in pozzetti per micropiastre, in genere nel formato a 96 pozzetti. Gli strumenti progettati principalmente per l'ELISA sono di solito strumenti economici che utilizzano filtri per la selezione della lunghezza d'onda e includono un software per l'analisi degli immunodosaggi. Anche se a volte viene utilizzato il nome più generico di lettore di assorbanza, l'applicazione che ha reso popolare questo tipo di lettori è l'ELISA, e quindi sono solitamente chiamati lettori ELISA.
Anche i lettori di micropiastre multimodali sono adatti alla misurazione ELISA e sono quindi elencati in questa categoria. Tuttavia, essi supportano la misurazione di altre tecnologie di rilevamento oltre all'assorbanza, come la luminescenza e la fluorescenza, e sono più complessi e costosi.
Come acquistare un lettore ELISA
Se si intende acquistare un lettore ELISA, è necessario tenere a mente i seguenti aspetti:
- Selezione della lunghezza d'onda: la maggior parte degli ELISA viene misurata a 405, 450 o 492 nm, talvolta con una misura di riferimento tra 590 e 630 nm, e tali filtri devono essere disponibili in ogni lettore ELISA. Tuttavia, se si prevede di misurare altri dosaggi, è probabile che siano necessari altri filtri, quindi verificare il numero di posizioni disponibili per i filtri.
- Incubazione: la maggior parte degli ELISA viene misurata a temperatura ambiente, ma un lettore dotato di riscaldamento della micropiastra è utile in molti casi, ad esempio per eseguire saggi di attività enzimatica.
- Software: in questo caso ci sono diverse considerazioni da fare. In primo luogo, l'ELISA richiede un software in grado di eseguire analisi quantitative e qualitative degli immunodosaggi. In secondo luogo, molti lettori ELISA utilizzano un software basato su PC, ma alcuni offrono anche la modalità standalone. In terzo luogo, è importante verificare che il software soddisfi tutti i requisiti della vostra azienda o istituzione, come la connettività al LIMS o la conformità alla FDA CFR 21 parte 11, o altri.
- Tecnologie di rilevamento: un lettore multimodale è più costoso di un semplice lettore ELISA, ma può essere utilizzato per misurare una gamma molto più ampia di dosaggi. A seconda dei dosaggi che si intende eseguire e della disponibilità di altri lettori nel laboratorio, potrebbe essere opportuno scegliere un lettore multimodale invece di un lettore ELISA.
Il lettore ELISA Apollo
L'Apollo è un eccellente lettore ELISA, che soddisfa tutti i punti sopra citati:
- 4 filtri preinstallati per ELISA (405, 450, 492 e 630 nm), più 4 posizioni disponibili per filtri aggiuntivi.
- Versione economica con incubatore fino a 50ºC (Apollo-I).
- Modalità standalone con potente software di analisi ELISA e stampante opzionale.
- Software LightCompass® per PC con conformità opzionale a FDA CFR 21 parte 11, integrazione LIMS e altro ancora.
Applicazioni dei lettori ELISA
Poiché l'assorbanza è utilizzata come tecnologia di lettura in molti test diversi, i lettori ELISA hanno un'ampia gamma di applicazioni, tra cui, ma non solo:
- ELISA e altri immunodosaggi
- Saggi di geni reporter basati sulla β-galattosidasi e la fosfatasi alcalina
- Quantificazione delle proteine mediante Lowry e Bradford
- Quantificazione del DNA mediante il test della difenilammina
- Saggi di vitalità e proliferazione cellulare con MTT, XTT e altri.
- Saggi di attività enzimatica.
Confronta i Lettori ELISA
Apollo | Tristar 3 | Tristar 5 | |
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Rivelatori | Fotodiodo per assorbanza |
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Assorbanza (Vis) | |||
Assorbanza (UV) | da 340 nm | ||
Luminescenza | |||
Fluorescenza | |||
TRF | |||
FP | |||
AlphaScreen |
Apollo | Tristar 3 | Tristar 5 | |
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Sistema ottico | Tecnologia unica | Unico percorso per tutte le tecnologie di rilevamento | Unico percorso per tutte le tecnologie di rilevamento |
Fonte di luce |
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Assorbanza della gamma spettrale | 340-750 nm | 200-1000 nm | 200-1000 nm |
Lettura "bottom" | |||
Filtri | |||
Monocromatore | |||
Identificazione del filtro | Manuale | Manuale | Manuale |
Scansione della lunghezza d'onda (assorbanza) | ✘ | ||
Monocromatore luce dispersa | 10-6 | ||
Larghezza di banda del monocromatore | 4-22 nm |
Apollo | Tristar 3 | Tristar 5 | |
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Iniettori | No | Fino a 3 iniettori JET con funzionamento senza attrito | Fino a 3 iniettori JET con funzionamento senza attrito |
Volume iniettore | 10-100 µL in passaggi da 1 µL | 10-100 µL in passaggi da 1 µL | |
Accuratezza dell'iniettore | Migliore del 2% sull’intera la gamma di volumi | Migliore del 2% sull’intera la gamma di volumi | |
Precisione dell'iniettore | Migliore del 2% sull’intera la gamma di volumi | Migliore del 2% sull’intera la gamma di volumi |
Apollo | Tristar 3 | Tristar 5 | |
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Formati di micropiastre | 96 pozzetti | Da 6 a 384 pozzetti | Da 6 a 384 pozzetti |
Formati di campioni aggiuntivi (facoltativo) |
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Apollo | Tristar 3 | Tristar 5 | |
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Agitatore | 3 modalità di agitazione: lenta, media e veloce | Lineare, orbitale, doppio orbitale, con velocità e diametro selezionabili | Lineare, orbitale, doppio orbitale, con velocità e diametro selezionabili |
Controllo della temperatura | da Temperatura Ambiente + 4°C a 50°C (solo per modello Apollo-I) | Da ambiente + 5 ° a 45 ° C | Da ambiente + 5 ° a 45 ° C |
Collegamento del gas |
Apollo | Tristar 3 | Tristar 5 | |
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Precisione dell'assorbanza | ≤ 0.2 % CV (@0-3 OD) (@405 nm) ≤ 1 % CV (@3-4 OD) (@405 nm) | Migliore dello 0,6% | Migliore dello 0,6% |
Acuratezza dell'assorbanza | ± 1 % o ± 0.005 OD (0-3 OD) a seconda di quale sia maggiore (@405 nm) ± 2 % (3-4 OD) (@405 nm) | Migliore dello 2% | Migliore dello 2% |
Intervallo dinamico | 0-4.0 OD | 0-3.5 OD | 0-3.5 OD |
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