Sebbene i nomi possano essere simili, un luminometro deve essere distinto da un fotometro e da un esposimetro:
- Fotometro è un termine molto ampio che include qualsiasi dispositivo che misura la luce, inclusi luminometri, misuratori di luce, spettrofotometri e altri.
- Anche l'esposimetro è un termine ampio, ma normalmente si riferisce a un piccolo dispositivo utilizzato in fotografia per misurare la luce ambientale.
Luminometri di Berthold Technologies
Berthold Technologies è un pioniere e leader di mercato nel rilevamento della luminescenza. Ecco i principali tipi di luminometri che offriamo. Di seguito troverai maggiori informazioni sul principio di un luminometro e sui diversi tipi di luminometri.
Principio di un luminometro
Per poter misurare le più piccole quantità di luce, i luminometri utilizzano un tubo fotomoltiplicatore (PMT). Un tubo fotomoltiplicatore amplifica notevolmente i segnali in ingresso rendendo rilevabili i segnali deboli. Il principio di funzionamento di un PMT è:
- I fotoni che colpiscono un fotocatodo alla finestra d'ingresso del PMT producono elettroni come conseguenza dell'effetto fotoelettrico.
- Questi elettroni vengono quindi accelerati da un campo ad alta tensione e moltiplicati di numero all'interno di una catena di dinodi dal processo di emissione secondaria.
- Gli elettroni amplificati raggiungono infine l'anodo che è collegato a un circuito di elaborazione in uscita.
- Il circuito traduce il segnale in ingresso in un segnale di uscita che può essere un impulso (se il PMT funziona in modalità di conteggio dei fotoni) o una corrente analogica (se il PMT funziona in modalità analogica nota anche come modalità corrente). La modalità di conteggio dei fotoni offre la migliore sensibilità ed è la modalità migliore per la misura della luminescenza, mentre la modalità analogica funziona meglio con alte intensità di luce ed è popolare per la misura della fluorescenza.
Per catturare la maggior quantità possibile di fotoni il PMT deve essere posizionato molto vicino al campione e in una posizione ottimizzata che riduce la perdita di fotoni provenienti dal campione e allo stesso tempo (nel caso di luminometri a micropiastra) allontana i fotoni proveniente da pozzetti adiacenti (crosstalk).
Oltre al PMT altre parti importanti di un luminometro sono:
- La chamber a tenuta di luce: l'area in cui vengono misurati i campioni deve essere assolutamente protetta dalla luce esterna. La chamber a tenuta di luce deve anche essere adatta al formato del campione misurato: Tubi, piastre o altri recipienti.
- Iniettori: non sono sempre necessari ma poiché la luminescenza è fornita da una reazione chimica è necessario aggiungere alcuni reagenti al campione. Se la cinetica della reazione è lenta, i reagenti possono essere aggiunti manualmente, ma per cinetica veloce gli iniettori di reagente possono essere utili per controllare accuratamente il tempo tra la dispensazione del reagente e la misura o addirittura necessario se la reazione dura solo uno o due secondi, come nel caso di assays flash.
La maggior parte dei luminometri non necessita di filtri o di un monocromatore poiché la luce di tutte le lunghezze d'onda viene raggruppata e misurata insieme. Tuttavia, alcuni assays come BRET necessitano di filtri per separare la luminescenza emessa dalle diverse proteine nel campione.
TIPI DI LUMINOMETRI
Un modo utile per classificare i luminometri è il formato campione che misurano poiché ciò ha un impatto su throughput, flessibilità, affidabilità e prezzo.
Luminometri a tubo
I luminometri a tubo possono misurare un campione contenuto in una tubo da test, tubo per microcentrifuga o simili. Sono semplici strumenti che misurano uno ad uno i campioni che l'operatore deve inserire manualmente. Ciò limita il throughput ma fornisce un'elevata sensibilità e affidabilità poiché non ci sono compromessi nel posizionamento del PMT.
Alcuni luminometri a tubo possono essere dotati di iniettori necessari per dispensare i reagenti nei assays flash (assays luminescenti con cinetica rapida).
Esistono diversi tipi di luminometri a tubo:
They are light enough to be portable and can be operated on battery power to be used on the field. They are less sensitive than benchtop luminometers, but still provide enough performance for demanding applications. The Junior is an excellent portable luminometer.
Luminometri a mano
Possono essere considerati una sottoclasse dei luminometri portatili. Sono ancora più piccoli e leggeri, ma hanno prestazioni molto basse e sono normalmente utilizzati solo per saggi qualitativi (ad esempio per discriminare se una superficie è contaminata o meno). Dato che la sua applicazione principale è il monitoraggio igienico delle superfici, spesso utilizzano tamponi speciali per la misurazione, che vengono utilizzati per strisciare la superficie e inseriti direttamente nel luminometro per la misurazione.
Luminometri per micropiastre
I luminometri per micropiastre misurano i campioni contenuti nei pozzetti delle micropiastre, tipicamente micropiastre da 96 o 384 pozzetti. Ciò aumenta notevolmente la produttività ma rende gli strumenti più complessi. Deve essere implementato un sistema per spostare la posizione di misura da pozzetto a pozzetto e la luce proveniente dai pozzetti adiacenti deve essere bloccata. Pertanto, sono più costosi dei luminometri a tubo.
La sensibilità del luminometro a piastra è normalmente inferiore a quella del luminometro a tubo da banco e il Centro XS è il luminometro a piastra più sensibile sul mercato.
Lettori multimodali
I lettori di micropiastre multimodali sono lettori di micropiastre in grado di misurare la luminescenza ma possono utilizzare altre tecnologie di rilevamento come la fluorescenza e l'assorbanza. Ciò aumenta la complessità dello strumento e rende necessari alcuni compromessi per bilanciare le prestazioni di tutti i metodi di rilevamento e fornisce una grande flessibilità inclusa la possibilità di utilizzare filtri o monocromatori. Di solito sono più costosi dei luminometri per micropiastre, ma i lettori multimodali come Tristar 3 possono essere configurati per adattarsi a qualsiasi budget.
Sistemi di imaging In Vivo
Sebbene il suo principio di funzionamento sia molto diverso da quello di un luminometro, i sistemi di imaging In Vivo sono anche uno strumento popolare per misurare la luminescenza. Usano una fotocamera invece di un tubo fotomoltiplicatore; ciò si traduce in una sensibilità inferiore ma consente la localizzazione spaziale dell'emissione di luce e la misura della luminescenza negli animali e nelle piante viventi.
LUMINOMETRI IN PRIMO PIANO
Ecco alcuni esempi dei nostri migliori luminometri in diversi formati: tubo, piastra e multimodale. Per controllare la nostra gamma completa, visitare le nostre pagine Luminometri a tubo e lettori di micropiastre a luminescenza. Se hai bisogno di aiuto per scegliere il luminometro migliore per le tue esigenze, contattaci e saremo lieti di aiutarti!