PRINCIPIO DI HTRF®
HTRF® si basa su Time-Resolved Fluorescence (TRF) e Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET).
In HTRF® il chelato di lantanide viene utilizzato come donatore ed è europio criptato (Eu3+ criptato) o Lumi4 ™ -Tb (Tb2+ criptato), e l'accettore è o il XL665, un'allophycocyanin modificata, o il d2, una seconda generazione di accettori. Inoltre, HTRF® implementa una misura raziometrica che utilizza sia la lunghezza d'onda di emissione del donatore che dell'accettore per correggere la variabilità da pozzetto a pozzetto e l'estinzione del segnale dai componenti e dai mezzi del test, che è assente in altri test TR-FRET.
APPLICAZIONI DI HTRF®
HTRF® viene utilizzato per misurare le interazioni molecolari in molte aree di ricerca, tra cui:
- Interazioni proteina-proteina
- GPCR
- Biomarcatori
- Fosfoproteine
- Chinasi
- Citochine
- Epigenetica
NOTE APPLICATIVE RELATIVE A HTRF®
cAMP/IP-One HTplex HTRF® assay with Mithras cAMP/IP-One HTplex cell-based experiment performed on Mithras LB 940 Multimode Microplate Reader using HTRF® technology
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LETTORI DI MICROPIASTRE CONSIGLIATI PER HTRF®
Si consiglia un lettore di micropiastre con le seguenti caratteristiche:
- Misura della fluorescenza mediante filtri
- Lampada flash come sorgente luminosa
- Rivelatore con gamma spettrale estesa (sopra 650 nm)
Tutti i lettori di micropiastre riportati di seguito sono consigliati per HTRF®.
HTRF® è un marchio registrato di Cisbio Bioassays.