QU'EST-CE QUE LA RADIO-HPLC (OU RADIOCHROMATOGRAPHIE) ?
La chromatographie est une méthode de laboratoire utilisée pour séparer les différents composants d'un mélange. Le mélange est dissous dans un liquide appelé phase mobile et l'amène vers une structure contenant un autre matériau, la phase stationnaire. Les différents composants du mélange se déplacent à des vitesses différentes et se séparent les uns des autres. Il existe différents types de chromatographie ; en chromatographie liquide à haute pression (HPLC), la phase mobile est un liquide à haute pression (généralement 400 bars).
Afin de mesurer la séparation du mélange, ses composants doivent être détectables d'une manière ou d'une autre. Il n'existe pas de détecteur universel qui puisse surveiller tous les composés. Par conséquent, différents types de détecteurs HPLC doivent être utilisés en fonction des propriétés des substances à séparer. Les détecteurs UV sont souvent utilisés car de nombreuses substances séparées dans l'HPLC absorbent généralement la lumière dans l'UV. Cependant, les détecteurs qui mesurent l'indice de diffraction, la diffusion de la lumière, la fluorescence, la conductivité et autres sont également utilisés en HPLC. L'intensité du signal mesuré est indiquée dans un graphique appelé chromatogramme : lorsqu'une séparation complète est réalisée, chaque composé apparaît comme un pic dans le chromatogramme. Le moment de l'apparition identifie le composé et l'aire du pic le quantifie. En radio-HPLC (ou radiochromatographie), les substances à séparer sont radioactives, car elles ont généralement été marquées avec un isotope radioactif tel que le 125I, 14C ou 3H. Cela nécessite l'utilisation d'un détecteur de radioactivité dans le système HPLC.
APPLICATIONS DE LA RADIO HPLC
Il existe de nombreuses applications radio HPLC/UPLC dans la recherche, les diagnostics, le contrôle qualité et d'autres domaines. Certaines applications sont importantes comme :
- Analyse pharmaceutique: la radio-HPLC est une technologie clé pour la séparation et la quantification des médicaments radiomarqués et des métabolites présumés dans le développement de médicaments.
- Analyse environnementale: une variété de polluants provenant de sources telles que les déchets industriels, les décharges, les pesticides et les produits pharmaceutiques peuvent se retrouver dans l'environnement. L'identification sophistiquée de ces contaminants nécessite des détecteurs très sensibles pour pouvoir détecter même les concentrations les plus faibles.
- Développement et contrôle de qualité des produits radiochimiques: la qualité des produits radiochimiques dépend du soin apporté à chaque étape de la préparation. Des règles strictes doivent être respectées lors de la production. L'analyse de la pureté radiochimique par radio-HPLC est souvent nécessaire pour vérifier la qualité des produits radiochimiques produits.
- Contrôle de qualité des anticorps et des protéines marqués radioactivement: l'analyse de l'identité radiochimique et de la pureté des anticorps et des protéines radiomarqués par radio-HPLC est une méthode simple et fiable pour s'assurer que seul l'anticorps ou la protéine radiomarqué est présent dans l'échantillon controlé.
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