PRINCIPE DU HTRF®
HTRF® est basé sur la Fluorescence Résolue dans le Temps (TRF) et le Transfert d'Energie de Résonance de Fluorescence (FRET).
Dans le HTRF®, le chélate de lanthanide est utilisé comme donneur et est soit le cryptate d'Europium (cryptate Eu3+), soit Lumi4™-Tb (cryptate Tb2+), et l'accepteur est soit XL665, une allophycocyanine modifiée, soit d2, une deuxième génération d'accepteur. En outre, le HTRF® met en œuvre une mesure ratiométrique qui utilise à la fois la longueur d'onde d'émission du donneur et de l'accepteur pour corriger la variabilité de puits à puits et l'extinction du signal des composants et des milieux d'essai, absente dans les autres essais TR-FRET
APPLICATIONS DU HTRF®
HTRF®" est utilisé pour mesurer les interactions moléculaires dans de nombreux domaines de recherche, notamment:
- Interactions protéine-protéine
- GPCRs
- Biomarqueurs
- Phosphoprotéines
- Kinases
- Cytokines
- Epigénétique
NOTES D'APPLICATION RELATIVES AU HTRF®
cAMP/IP-One HTplex HTRF® assay with Mithras cAMP/IP-One HTplex cell-based experiment performed on Mithras LB 940 Multimode Microplate Reader using HTRF® technology
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LECTEURS DE MICROPLAQUES RECOMMANDÉS POUR LE HTRF®
Un lecteur de microplaques, présentant les caractéristiques suivantes, est recommandé:
- Mesure de la fluorescence à l'aide de filtres
- Lampe flash comme source de lumière
- Détecteur à gamme spectrale étendue (au-dessus de 650 nm)
Tous les lecteurs de microplaques ci-dessous sont recommandés pour le HTRF®
HTRF® est une marque déposée de Cisbio Bioassays.