¿QUÉ ES LA RADIOCROMATOGRAFIA (Radio-HPLC)?
La cromatografía es un método de laboratorio realizado para separar los diferentes componentes de una mezcla. La mezcla se disuelve en un fluido llamado fase móvil, que la transporta a través de una estructura que contiene otro material, la fase estacionaria. Los diversos constituyentes de la mezcla viajan a diferentes velocidades, haciendo que se separen. Existen diferentes tipos de cromatografía; en el caso de la cromatografía líquida de alta presión (HPLC), la fase móvil es un líquido a alta presión (típicamente 400 bar).
Con el fin de medir la separación de la mezcla, sus componentes tienen que ser detectables de alguna manera. No existe un detector universal que pueda monitorear todos los compuestos. Por lo tanto, se tienen que usar diferentes tipos de detectores de HPLC dependiendo de las propiedades de las sustancias que se van a separar. Los detectores UV son usado a menudo, ya que muchas sustancias típicamente separadas en HPLC absorben la luz en el UV. Otros detectores usados habitualmente en HPLC miden el índice de difracción, la dispersión de la luz, la fluorescencia, la conductividad y más. La intensidad de la señal medida se representará en el gráfico denominado cromatograma: suponiendo una separación completa, cada compuesto aparecerá en el cromatograma como un pico. El tiempo de aparición identifica el compuesto, y el área del pico lo cuantifica. En el caso de la radio-HPLC (o radiocromatografía), las sustancias a separar son radiactivas, normalmente porque se han marcado usando un isótopo radiactivo, tal como 125I, 14C o 3H. Esto requiere el uso de un detector de radiactividad en el sistema de HPLC.
APLICACIONES DE la RADIO-HPLC
La radio HPLC tiene numerosas aplicaciones en investigación, diagnóstico, control de calidad y otros campos. Algunas aplicaciones importantes son:
- Análisis Farmacéutico: La radio-HPLC es una tecnología clave para la separación y cuantificación de fármacos radiomarcados y metabolitos putativos en el desarrollo de fármacos.
- Análisis Ambiental: Una amplia variedad de contaminantes de fuentes tales como desechos industriales, vertederos, pesticidas y medicamentos farmacéuticos pueden llegar al medio ambiente. La difícil identificación de estos contaminantes exige detectores altamente sensibles para permitir la detección de concentraciones muy bajas.
- Desarrollo y CC de Radioquímicos: Los radioquímicos son solo tan buenos como el cuidado tomado en cada paso de preparación. Deben cumplirse estrictamente las normativas pertinentes durante la producción. El análisis de pureza radioquímica usando radio-HPLC es requerida a menudo para verificar la calidad de los radioquímicos producidos.
- CC de anticuerpos y proteínas radiomarcados: El análisis radioquímico de identidad y pureza de anticuerpos y proteínas radiomarcados usando radio-HPLC es un método simple y fiable para asegurar que solo el anticuerpo o proteína radiomarcados están presentes en la muestra de control de calidad.
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