La Transferencia de Energía por Resonancia de Fluorescencia (FRET) es un fenómeno físico que requiere la proximidad de una molécula donante y una molécula receptora (normalmente de 1 a 10 nm). Como resultado de la excitación por luz que sólo el donante puede absorber, el colorante donante cambia a un estado excitado y transfiere energía sin la emisión de un fotón al colorante aceptor. Si el colorante aceptor es fluorescente, emitirá luz, típicamente a una longitud de onda mucho más larga que la que el colorante donante puede emitir por sí mismo. Hoy en día, las técnicas FRET se están empleando en una amplia variedad de aplicaciones, tales como estudios de receptor/ligando, ensayos de fusión de membrana, ensayos de proteasa fluorogénica o inmunoensayos.
La diversidad de métodos y fluoróforos disponibles hace que la flexibilidad en la detección de fluorescencia sea una necesidad. Nuestros lectores de microplacas le permiten no solo detectar la Intensidad de Fluorescencia (FI), sino también otras tecnologías de ensayo como FRET, TRF, HTRF® o Polarización de Fluorescencia (FP).
Comparar lectores de microplacas de fluorescencia
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Sistema óptico | Ruta única para todas las tecnologías de detección | Ruta única para todas las tecnologías de detección |
Fuentes de luz |
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Rango espectral Absorbancia | 200-1000 nm | 200-1000 nm |
Rango espectral Luminiscencia | Estándar: 280-650 nm Extendido: 280-850 nm | Estándar: 280-650 nm Extendido: 280-850 nm |
Spectral range Fluorescence | Excitación: 230-1000 nm | Excitación: 230-1000 nm |
Lectura desde abajo |
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Filtros |
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Monocromador |
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Escaneo de longitud de onda | ✘ |
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Luz parásita de monocromador (stray light) |
| 10-6 |
Ancho de banda del monocromador |
| 4-22 nm |
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Inyectores | Hasta 3 inyectores JET sin fricción | Hasta 3 inyectores JET sin fricción |
Volumen de inyección | 10-100 µL en pasos de 1 µL | 10-100 µL en pasos de 1 µL |
Exactitud del inyector | Mejor que el 2% en todo el rango de volumen | Mejor que el 2% en todo el rango de volumen |
Precisión del inyector | Mejor que el 2% en todo el rango de volumen | Mejor que el 2% en todo el rango de volumen |
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Formatos de microplaca | 6 a 384 pocillos | 6 a 384 pocillos |
Ajuste de la altura de la placa | 3 adaptadores diferentes según del tipo de placa | 3 adaptadores diferentes según del tipo de placa |
Formatos de muestra adicionales (opcional) |
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Precisión en absorbancia | Mejor que 0.6% | Mejor que 0.6% |
Exactitud en absorbancia | Mejor que 2% | Mejor que 2% |
Sensibilidad en luminiscencia | <6 amol (0.03 pM) ATP/pocillo (placa de 96 pocillos) | <6 amol (0.03 pM) ATP/pocillo (placa de 96 pocillos) |
Sensibilidad en fluorescencia | <7 amol (0.35 pM) Fluoresceína (placa 384sv) | <7 amol (0.35 pM) Fluoresceína (384sv placa) |
Sensibilidad en TRF | No disponible | 5 amol Eu (placa de 96 pocillos) |
Crosstalk | 10-6 | 10-6 |
Rango dinámico | >6 órdenes de magnitud | >6 órdenes de magnitud |
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