¿POR QUÉ ES IMPORTANTE LA LUMINISCENCIA CELULAR?
La respuesta de quimioluminiscencia celular de fagocitos proporciona información sobre algunas enfermedades específicas como infecciones bacterianas y virales, diabetes mellitus, artritis, cáncer, etc. La quimioluminiscencia celular es también un ensayo muy sensible para determinar la toxicidad de agentes ambientales u ocupacionales en células fagocíticas. La insuficiencia e hiperactividad de la fagocitosis dependiente de oxígeno de los granulocitos puede detectarse fácilmente usando quimioluminiscencia celular.
¿CÓMO SE MIDE LA LUMINISCENCIA CELULAR?
La luminiscencia celular tiene una intensidad muy baja y, por lo tanto, es difícil de detectar. Para potenciar el efecto quimioluminiscente, se pueden añadir sustratos que se sabe que reaccionan quimioluminiscentemente con metabolitos de oxígeno reactivos y se puede detectar la siguiente emisión de luz. El luminol y la lucigenina son sustancias utilizadas habitualmente en este tipo de ensayos:
- El luminol reacciona con H2O2 y, como resultado, el producto activado electrónicamente emite fotones a una longitud de onda de 425 nm.
- Lucigenina reacciona con O2- que causa la emisión de luz a 470 nm.
Esta luz emitida puede ser monitorizada por luminómetros de microplacas con control de temperatura. La cantidad de luz puede aumentarse adicionalmente añadiendo un catalizador eficaz, tal como la enzima mieloperoxidasa (MPO), que se encuentra en los granulocitos y que produce emisión de luz nativa. MPO reacciona con H2O2, O2 y Cl para producir HOCl (ácido hipocloroso) que destruye los cuerpos extraños invasores.