PRINCIPIO DE LAS MEDICIONES DE ATP
El ATP participa en la oxidación de la luciferina por la enzima luciferasa de luciérnaga (firefly), una reacción que produce luz. La cantidad de luz producida es proporcional a la cantidad de luciferina oxidada. Esta reacción es muy popular en los ensayos de genes marcadores, donde el ATP y la luciferina están en exceso, y la cantidad o la luz producida está limitada por la expresión de la luciferasa (el marcador). Sin embargo, se puede usar la misma reacción para cuantificar ATP si tanto la luciferina como la luciferasa están en exceso.
APLICACIONES DE LAS MEDICIONES DE ATP
Las mediciones de ATP se utilizan para monitorear materias primas, plantas de fabricación o alimentos, medicamentos y equipos de atención médica para detectar contaminación bacteriana, a menudo para el monitoreo de la higiene, así como para el análisis de aguas residuales.
En las industrias biotecnológica y farmacéutica, las mediciones de ATP se utilizan para evaluar la proliferación celular, la apoptosis y la citotoxicidad. Pueden realizarse ensayos de viabilidad celular, por ejemplo, en ensayos de quimiosensibilidad tumoral y ensayos de susceptibilidad a antibióticos y determinación de enzimas y metabolitos en reacciones acopladas a ATP. El ensayo bioluminiscente de ATP se ha vuelto muy popular debido a su alta sensibilidad y comodidad.
NOTAS DE APLICACIÓN RELACIONADAS CON LAS MEDICIONES DE ATP
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INSTRUMENTOS RECOMENDADOS PARA MEDICIONES DE ATP
El segundo elemento más importante necesario para la cuantificación de ATP es un lector de luminiscencia. Los luminómetros de mano son populares para el monitoreo de la higiene de las superficies. Sin embargo, su sensibilidad y rango dinámico son muy limitados, y normalmente solo son adecuados para el análisis cualitativo. Para ensayos que requieren alta sensibilidad y confiabilidad, se recomienda un instrumento de laboratorio de alto rendimiento; las opciones incluyen luminómetros de tubo y lectores de microplacas de luminiscencia.