RECEPTORES ACOPLADOS A PROTEÍNA G (GPCR)
Existen diferentes familias de receptores celulares, y la mayor es la familia de receptores acoplados a proteína G (GPCR). Los GPCR están implicados en muchas funciones celulares y enfermedades, como el cáncer o los trastornos neurológicos. La transducción de señales mediante un GPCR comienza con una proteína G inactiva acoplada al receptor. Una vez que el GPCR reconoce un ligando, la conformación del receptor cambia para activar la proteína G, lo que hace que se disocie del receptor y se asocie con proteínas efectoras. La interacción de las proteínas G con el receptor o con las proteínas efectoras se puede medir mediante un ensayo BRET. Un ensayo comercial que mejora la sensibilidad y confiabilidad de BRET es NanoBRET™. Para obtener más información sobre cómo utilizar esta herramienta de análisis de interacciones proteina-proteína en un lector de microplacas, descargue nuestra nota de aplicación:
Los GPCR activan 2 vías principales de transducción de señales: la vía del AMPc y la vía del fosfatidilinositol. Una herramienta valiosa para el estudio de ambas vías es la cuantificación de sustancias producidas por la vía. Los ensayos HTRF® están disponibles para la cuantificación de AMPc, el segundo mensajero de la vía del AMPc, y monofosfato de inositol, un metabolito estable del trifosfato de inositol producido por la vía del fosfatidilinositol. El lector multimodo Tristar 5 es compatible con todos los kits HTRF®.
Ensayos de gen reportero
Una respuesta celular importante es la regulación de la expresión genética, pero la expresión de muchos genes es difícil de medir porque no tienen un efecto visible que pueda cuantificarse. Una excelente herramienta para estudiar la regulación de la expresión génica es el uso de genes reporteros. El sistema Dual-Luciferase Reporter® (DLR™) es un sistema de gen reportero muy popular que se puede medir de manera óptima en cualquiera de nuestros lectores de microplacas.
A continuación puede descargar las notas de aplicación del sistema DLR™ para diferentes instrumentos:
ACTIVIDAD DE PROTEÍNA QUINASAS
Como se mencionó anteriormente, otras respuestas celulares importantes son la regulación de las interacciones proteína-proteína y de la actividad enzimática. Ambos pueden regularse mediante la fosforilación de proteínas, que se realiza mediante proteína quinasas. La actividad de las proteína quinasas se puede cuantificar midiendo la concentración de ADP en una solución que contiene una proteína quinasa de interés. El ensayo Transcreener® ADP2 FI ofrece una forma muy conveniente, rápida y fiable de cuantificar el ADP. El Tristar 5 es un lector certificado para la medición de ensayos Transcreener® FI.
Dual-Luciferase Reporter™, DLR® y NanoBRET™ son marcas comerciales de Promega Corporation.
HTRF® es una marca registrada de Cisbio Bioassays.
Transcreener® es una marca registrada de Bellbrook Labs.